Cūku akūtās caurejas sindroma koronavīruss (SADS-CoV) ir jaunatklāts cūku zarnu trakta patogēns koronavīruss, kas var izraisīt ūdeņainu caureju jaundzimušajiem sivēniem un radīt ievērojamus ekonomiskus zaudējumus cūkkopības nozarei.Pašlaik nav piemērotas seroloģiskās metodes SADS-CoV infekcijas un vakcīnas efektivitātes novērtēšanai, tāpēc ir steidzami jāizmanto efektīvs ar enzīmu saistīts imūnsorbcijas tests (ELISA), lai kompensētu šo trūkumu.Šeit tika uzbūvēta rekombinantā plazmīda, kas ekspresē SADS-CoV smaile (S) proteīnu, kas sakausēta ar cilvēka IgG Fc domēnu, lai ražotu rekombinanto bakulovīrusu un ekspresētu HEK 293F šūnās.S-Fc proteīns tiek attīrīts ar proteīna G sveķiem un saglabā reaktivitāti ar anti-cilvēka Fc un anti-SADS-CoV antivielām.Pēc tam S-Fc proteīns tika izmantots, lai izstrādātu netiešo ELISA (S-iELISA) un optimizētu S-iELISA reakcijas apstākļus.Rezultātā, analizējot OD450nm vērtību 40 SADS-CoV negatīviem serumiem, kas apstiprināti ar imunofluorescences testu (IFA) un Western blotēšanu, robežvērtība tika noteikta kā 0,3711.6 SADS-CoV pozitīvo serumu variācijas koeficients (CV) S-iELISA testos un starp tiem bija mazāks par 10%.Krustreaktivitātes tests parādīja, ka S-iELISA nav krusteniskas reaktivitātes ar citiem cūku vīrusu serumiem.Turklāt, pamatojoties uz 111 klīnisko seruma paraugu noteikšanu, kopējais IFA un S-iELISA sakritības rādītājs bija 97,3%.Vīrusu neitralizācijas tests ar 7 dažādām seruma OD450nm vērtībām parādīja, ka S-iELISA konstatētā OD450nm vērtība pozitīvi korelēja ar vīrusa neitralizācijas testu.Visbeidzot, S-iELISA tika veikta 300 cūku fermas seruma paraugiem.Citu cūku enterovīrusu komerciālie komplekti parādīja, ka SADS-CoV, TGEV, PDCoV un PEDV IgG pozitīvie rādītāji bija attiecīgi 81,7%, 54% un 65,3%., attiecīgi 6%.Rezultāti liecina, ka S-iELISA ir specifiska, jutīga un reproducējama, un to var izmantot, lai noteiktu SADS-CoV infekciju cūkkopības nozarē.Šis raksts ir aizsargāts ar autortiesībām.Visas tiesības aizsargātas.
Publicēšanas laiks: 22. jūnijs 2021